毛細(xì)管電泳是一種高效、高靈敏度的分離分析技術(shù),是利用電場作用下帶電粒子在水性介質(zhì)中的遷移行為,實現(xiàn)對樣品中各組分的有效分離。在電泳過程中,待分析樣品通過進(jìn)樣器進(jìn)入充滿緩沖溶液的毛細(xì)管內(nèi),在外加電場的作用下,樣品中的離子或分子根據(jù)其電荷性質(zhì)和大小,以不同的速度向毛細(xì)管兩端遷移。通過檢測器對分離后的組分進(jìn)行檢測,從而實現(xiàn)對樣品中各組分的定性和定量分析。已經(jīng)在生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)、食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。
根據(jù)分離原理的不同,毛細(xì)管電泳可以分為以下幾類:
1. 膠束電動毛細(xì)管色譜(MEKC):利用表面活性劑膠束與待分析物之間的相互作用,實現(xiàn)對待分析物的分離。適用于疏水性物質(zhì)的分析。
2. 等電聚焦(IEF-CE):利用兩性電解質(zhì)在電場作用下形成pH梯度,實現(xiàn)對待分析物根據(jù)其等電點的差異進(jìn)行分離。適用于蛋白質(zhì)等兩性電解質(zhì)的分析。
3. 膠束電動復(fù)合(MECC):結(jié)合了膠束電動毛細(xì)管色譜和等電聚焦的特點,可以實現(xiàn)對待分析物的高效分離。
4. 離子交換(IEX-CE):利用離子交換樹脂對待分析物中的各種離子進(jìn)行選擇性吸附,實現(xiàn)對待分析物的分離。適用于離子型物質(zhì)的分析。
5. 親和毛細(xì)管電泳(ACE):利用待分析物與特異性親和配體之間的親和力,實現(xiàn)對待分析物的分離。適用于生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等的分析。
毛細(xì)管電泳在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:
1. 藥物分析:具有高分辨率、高靈敏度等優(yōu)點,可以用于藥物的快速篩選、定量分析和質(zhì)量控制。例如,對中藥制劑中的有效成分進(jìn)行分析,可以提高藥物分析的準(zhǔn)確性和效率。
2. 基因分析:可以用于DNA、RNA等生物大分子的分離和定量分析。例如,對基因突變進(jìn)行檢測,可以為遺傳病的診斷提供依據(jù)。
3. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究:在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中具有重要應(yīng)用價值。例如,對蛋白質(zhì)進(jìn)行分離和定量分析,可以為蛋白質(zhì)的功能研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
4. 細(xì)胞內(nèi)組分分析:可以用于細(xì)胞內(nèi)組分的分離和定量分析。例如,利用毛細(xì)管電泳技術(shù)對細(xì)胞內(nèi)的代謝物進(jìn)行分析,可以為細(xì)胞功能研究提供依據(jù)。